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部位特異的アミノ酸置換法の履歴

履歴一覧

Site-directed mutagenesis Quick change

標的部位のDNA配列を一塩基だけ変えたprimerを二本作り、プラスミドと混ぜてPCRすると、変異型のプラスミドができる。20倍程度まで増やす。
DpnⅠで処理すると、大腸菌由来のDNAは切断される(Aのメチル化)が、変異型プラスミドは試験管内では切断されない。