akki-raのブック
(506 keywords)

よく使われているタグ

akki-raのお気に入り

  • Ryutoのブック Ryutoのブック
  • catchのブック catchのブック
  • SHINYの気になる言葉 SHINYの気になる言葉
  • shinout.knowledge shinout.knowledge

akki-raのブックのメンバー

  • 西小倉パンデイロ 西小倉パンデイロ
  • !! (^ ..O ^ ) !! SHINYA !! (^ ..O ^ ) !! SHINYA
  • デイヴィッド デイヴィッド
  • なおき なおき
 

免疫沈降法

0pt

ある特定のタンパク質と結合するものを細胞破砕液中から見つけ出す。

baitにはhisタグがついている。
タグ配列を特異的に認識する抗体
抗体の非可変部であるFcに結合するproteinA,Gにアガロースビーズをつけておく。
これにより、baitとpreyが結合するとアガロースビーズの重で沈む。
※抗原決定基
HAtag
c-Myc tag
Flag tag
免疫沈降法はファージを用いたスクリーニング等である程度preyを絞ってから使う。

  • baitにc-Myc tag、preyにFlag tag をそれぞれ配列したプラスミドを作る。


細胞に入れる

細胞を破砕

免疫沈降後、Western blottingを行う。

  • Far Western

特異的な抗体の替わりに、baitタンパク質をプローブとして使用。
※質しかわからない

  • 細胞破砕液→SDS-PAGE→ビオチン化したbaitタンパク質を加え、アビジンと架橋せたHRP(horse radish peroxidase)またはAP(alkaliphosphatase)を添加後、基質と反応せる。

「免疫沈降法」について友人に書いてもらう。

あなたにとって「免疫沈降法」とは?

ログインするとワンクリックでキーワードを投稿できます

ログインする 新規登録する

他の人の「免疫沈降法」を見る